阳性克隆-筛选阳性克隆

摘要： 本文目录一览：1、蓝白筛选的阳性克隆反映什么酶不具有活性2、...

本文目录一览：

• 1、蓝白筛选的阳性克隆反映什么酶不具有活性
• 2、为什么白色菌落为含有重组质粒的阳性克隆?
• 3、为什么白色菌落为含有重组质粒的阳性克隆

蓝白筛选的阳性克隆反映什么酶不具有活性

β-半乳糖苷酶。蓝白筛选的阳性克隆反应中，β-半乳糖苷酶不具有活性2。

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蓝白斑筛选在指示培养基上，未转化质粒的菌落因无抗生素抗性而不能生长，重组质粒的菌落是白色的，非重组质粒的菌落是蓝色的，以颜色不同为依据直接筛选重组克隆的方法。

为什么白色菌落为含有重组质粒的阳性克隆?

1、与重组质粒中的其他表达基因有关。白色菌落的形成与重组质粒中的其他表达基因有关。在重组质粒构建的过程中，除了选择标记基因外，还可以将其他感兴趣的基因片段或表达元件插入到重组质粒中。

2、重组质粒中还携带了某些表达基因，通过这些基因的表达，细菌可以产生特定的酶或蛋白质，导致了菌落颜色的变化。如某些基因的表达会导致菌落呈白色。一些重组质粒中携带的基因具有抗菌素分解或降解的功能。

3、然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地导致无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。

为什么白色菌落为含有重组质粒的阳性克隆

1、与重组质粒中的其他表达基因有关。白色菌落的形成与重组质粒中的其他表达基因有关。在重组质粒构建的过程中，除了选择标记基因外，还可以将其他感兴趣的基因片段或表达元件插入到重组质粒中。

2、重组质粒中还携带了某些表达基因，通过这些基因的表达，细菌可以产生特定的酶或蛋白质，导致了菌落颜色的变化。如某些基因的表达会导致菌落呈白色。一些重组质粒中携带的基因具有抗菌素分解或降解的功能。

3、然而，当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，会产生无α-互补能力的氨基端片段，使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。