第二代测序-第二代测序技术的优缺点

摘要： 本文目录一览：1、二代测序原理及应用2、第二代DNA测序技术的基本原理...

本文目录一览：

• 1、二代测序原理及应用
• 2、第二代DNA测序技术的基本原理
• 3、第二代DNA测序技术的介绍
• 4、相比一代测序技术,二代测序技术具有哪些优点
• 5、二代测序的生物名称是什么

二代测序原理及应用

1、二代测序又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。关于二代测序的临床应用：二代测序作为一种检测手段，主要应用于基因的生殖变异（遗传性）与体细胞变异（获得性）的检测。

2、二代测序原理也就是文库构建，PCR产生的片段或基因组打断的片段两端需要添加接头修饰才能进行测序。末端修饰。打断的片段是随机断裂，其末端可能是不平的。因此，建库第一步是补齐不平的末端。添加接头。

3、二代测序在DNA***过程中通过捕捉新添加的碱基所携带的特殊标记（一般为荧光分子标记）来确定DNA的序列，现有的技术平台主要包括Roche的454 FLX、Illumina的Miseq/Hiseq等。

4、测序原理：将基因组 DNA 片断化，然后克隆到质粒载体上，再转化大肠杆菌。对于每个测序反应，挑出单克隆，并纯化质粒 DNA。

5、二代测序应用如下：Illumina 原理：桥式PCR+4色荧光可逆终止+激光扫描成像。Roche 454：油包水PCR + 4种dNTP车***战 + 检测焦磷酸水解发光。

第二代DNA测序技术的基本原理

第二代测序（Next-generation sequencing，NGS）又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。

二代测序原理：分别把 DNA 分子链以一种叫Sanger 方法的方法进行分解，然后再测序，这样就能够得到一条完整的DNA链，从而确定 DNA序列.二代测序技术的优势在于快速、准确、效率高，可以同时测定大量样品。

原理 二代测序原理也就是文库构建，PCR产生的片段或基因组打断的片段两端需要添加接头修饰才能进行测序。末端修饰。打断的片段是随机断裂，其末端可能是不平的。因此，建库第一步是补齐不平的末端。添加接头。

而PCR捕获不需要DN段化，直接先PCR把目标区域富集然后再加接头。而不论是哪种捕获技术，靶向区域测序一般都有以下环节：DNA提取，文库制备，目标区域富集，上机测序四大环节。

基本原理 Illumina/Solexa Genome Analyzer测序的基本原理是边合成边测序。

第二代DNA测序技术的介绍

二代测序又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。关于二代测序的临床应用：二代测序作为一种检测手段，主要应用于基因的生殖变异（遗传性）与体细胞变异（获得性）的检测。

二代测序技术的应用可以概括为基因组测序、转录组测序、甲基化测序、重测序和蛋白质组学。其中，基因组测序可以用来研究遗传学、疾病基因、基因表达、生物多样性和深入研究基因组结构能。

第二代测序技术的核心思想是边合成边测序，即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列，现有的技术平台主要包括Roche/454 FLX、Illumina/Solexa Genome Analyzer和lied Biosystems SOLID system。

第二代测序：为高通量测序，用微珠或高密度芯片边合成边测序，代表有454，solexa，solid，高通量，可一次获得数G数据，相对与第三代，都仍然需要扩增的方法放大信号，扩增后再检测。

相比一代测序技术,二代测序技术具有哪些优点

1、二代测序原理：分别把 DNA 分子链以一种叫Sanger 方法的方法进行分解，然后再测序，这样就能够得到一条完整的DNA链，从而确定 DNA序列.二代测序技术的优势在于快速、准确、效率高，可以同时测定大量样品。

2、第一代测序技术一个反应只能得到一条序列，因此测序通量很低； 第一代测序技术虽然单个反应价格低廉，但是获得大量序列的成本很高。

3、二代测序技术虽然通量很高，成本低廉，但是读长实在太短，主流的Illumina测序仪，常规模式只能测PE150的长度，靠着软件算法上的进步才得以可用。由此三代测序走上了历史舞台。

4、在测序市场中，一代测序因其准确度高，仍作为突变检测、单菌鉴定等的金标准而存在。 以illumina HiSeq和MiSeq为代表的二代测序势头强劲，主打低成本和高通量，2017新机型NovaSeq更宣称已将测序成本降至百美金。

5、NGS主要优势是通量大，可以得到海量的数据，高通量最小的数据量单位是G，而一代测序一次只能产生1K的数据。

二代测序的生物名称是什么

二代测序又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。关于二代测序的临床应用：二代测序作为一种检测手段，主要应用于基因的生殖变异（遗传性）与体细胞变异（获得性）的检测。

第二代测序（Next-generation sequencing，NGS）又称为高通量测序（High-throughput sequencing），是基于PCR和基因芯片发展而来的DNA测序技术。

二代测序（NGS），又称为高通量测序，是低成本、高准确度、一次可对多个样本的几十万甚至几百万条DNA分子同时进行快速测序分析的新一代测序技术，虽然已被广泛运用于临床，但尚无科学协会对其在肿瘤学实践中的应用提出建议。

NGS又叫高通量测序，当传统的癌症治疗不起作用，或者医生不能确定患者的癌症起源（原发灶）时，NGS（二代测序）可以帮助确定肿瘤中的基因突变，这些突变可能与某些针对特定变异的药物相匹配。

即第二代DNA测序技术。第二代测序技术的核心思想是边合成边测序，即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列，现有的技术平台主要包括Roche/454 FLX、Illumina/Solexa Genome Analyzer和lied Biosystems SOLID system。

二代测序技术又称为高通过量测序技术，是对传统Sanger测序（称为一代测序技术）革命性的改变。二代测序技术的核心思想是边合成边测序，可以一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定，所以又被称深度测序。